Immunoensayo de fluorescencia exacta en casetes de pruebas para enfermedades cardiovasculares

ElCásete de ensayo de la troponina I/D-dimero/NT-proBNP (3 en 1)(Sangre entera/ suero/ plasma) está destinado aen el laboratorioDeterminación cuantitativa de lasTroponina I cardíaca, D-dimero y NT-proBNP en sangre entera, suero o plasma como ayuda en el diagnóstico del infarto de miocardio (IM),insuficiencia cardíaca, TVP y EP.

[RESUMO]

El D-dimero (o D-dimero) es un producto de degradación de la fibrina (o FDP), un pequeño fragmento de proteína presente en la sangre después de que un coágulo sanguíneo se degrada por fibrinólisis.Su formación o aumento refleja la activación del sistema de coagulación y fibrinólisis, y su nivel plasmático puede representar la producción de fibrina, agente activo de la trombina in vivo.El contenido de D-dimero en pacientes con trombosis es significativamente elevado^{Las demás:}.

Además, los estudios han demostrado que los niveles bajos deD-dimero(100-500 ng/ ml) están estrechamente relacionados con la aparición de enfermedades cardiovasculares, y los niveles elevados de D-dimero pueden ser indicadores de exclusión diagnóstica temprana para la TVP y la EP.^{Las demás:}.

El N-terminal del péptido natriurético del cerebro prohormona (NT-proBNP) es un 76 aminoácidosN-terminalesproteína inactiva que se separa del proBNP para liberarNatriurético para el cerebro Peptídeo. AmbosLos niveles sanguíneos de BNP y NT-proBNP se utilizan para el cribado, diagnóstico de enfermedades agudas y tratamiento de enfermedades graves.insuficiencia cardíaca congestiva(ICH) y puede ser útil para establecer el pronóstico en la insuficiencia cardíaca, ya que ambos marcadores son típicamente más altos en pacientes con peor resultado.^{Las demás:}The plasma concentrations of both BNP and NT-proBNP are also typically increased in patients with asymptomatic or symptomatic left ventricular dysfunction and is associated with coronary artery disease and myocardial ischemia.^{También se ha desarrollado una serie de programas de investigación.}

La troponina cardíaca I es una proteína que se encuentra en el músculo cardíaco, con un peso molecular de 22,5 kDa.^{Las demás:}La troponina I es parte de un complejo de tres subunidades compuesto por la troponina T y la troponina C. Junto con la tropomiosina,este complejo estructural forma el componente principal que regula la actividad de la ATPasa sensible al calcio de la actomyosina en el músculo esquelético estriado y cardíaco.^{Las demás:}Después de ocurrir una lesión cardíaca, la troponina I se libera en la sangre 4-6 horas después del inicio del dolor.pero mientras que los niveles de CK-MB vuelven a la normalidad después de 72 horas, la troponina I permanece elevada durante 6 a 10 días, lo que permite una ventana de detección más larga para la lesión cardíaca.

The Troponin I/D-Dimer/NT-proBNP (3 in 1) Test Cassette (Whole Blood/Serum/Plasma) is a simple test that utilizes a combination of antibody coated particles and capture reagent to detect cardiac Troponin I, D-dimero y NT-proBNP en sangre entera, suero o plasma.

[Principio]

El Test de Troponina I/ D-dimero/ NT-proBNP (3 en 1) detecta la troponina cardíaca I, D-dimero y NT-proBNP basándose en el Immunoensayo de Fluorescencia.La muestra se mueve a través de la tira de la almohadilla de muestra a la almohadilla de absorciónSi la muestra contiene cTnI, D-dimero o NT-proBNP, se adhieren a los anticuerpos específicos conjugados con las microsferas fluorescentes.Luego, el complejo será capturado por los anticuerpos de captura recubiertos en la membrana de nitrocelulosa (línea de ensayo).La concentración de cTnI, D-dimero y NT-proBNP en la muestra se correlaciona con la intensidad de la señal de fluorescencia capturada en la línea de ensayo.De acuerdo con la intensidad de fluorescencia de la curva estándar de ensayo y producto, la concentración de cTnI, D-dimero y NT-proBNP en la muestra puede calcularse con el analizador para mostrar la concentración de cTnI, D-dimero y NT-proBNP en la muestra.

[Reactivos]

El kit de ensayo incluye fluoróforos recubiertos con anticuerpos cTnI, fluoróforos recubiertos con anticuerpos D-dimeros, fluoróforos conjugados con anticuerpos NT-proBNP y reactivos de captura recubiertos en la membrana.

[Precauciones]

• Para profesionalesen el laboratoriosólo para uso diagnóstico.
• No utilice después de la fecha de caducidad indicada en el envase.
• Evitar la contaminación cruzada de las muestras mediante el uso de un nuevo recipiente de recogida de muestras para cada muestra obtenida.
• No coma, beba ni fume en el área donde se manipulan las muestras y los análisis.Observar las precauciones establecidas contra los peligros microbiológicos durante todo el procedimiento y seguir los procedimientos estándar para la eliminación adecuada de las muestras.. Usar ropa de protección como abrigos de laboratorio, guantes desechables y protección para los ojos cuando se analicen las muestras.
• No intercambiar ni mezclar reactivos de lotes diferentes.
• La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente a los resultados.
• Los materiales de ensayo utilizados deben desecharse de acuerdo con las normas locales.
• Leer el procedimiento completo cuidadosamente antes de realizar cualquier prueba.
• ElLas concentraciones de la troponina I/D-dimero/NT-proBNP ((3 en 1) en el casete de ensayosólo debe ser utilizado con el analizador por profesionales médicos autorizados.

[almacenamiento y estabilidad]

1El ensayo debe conservarse a 4-30 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la bolsa sellada.

• El ensayo debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso.
• No congele.
• Se debe tener cuidado de proteger los componentes del kit de la contaminación.
• No utilizar si hay indicios de contaminación microbiana o precipitación.

[Recolección y preparación de muestras]

Preparación

• Antes de realizar el ensayo, asegúrese de que todos los componentes estén a temperatura ambiente (15-30 °C).La solución tampón fría o la condensación de humedad en la membrana pueden dar lugar a resultados de ensayo inválidos..
• Saque de la caja un tubo con solución tampón, con el nombre o identificación del paciente.

Manejo de muestras

• Recoger la muestra de acuerdo con los procedimientos estándar.
• No dejar las muestras a temperatura ambiente durante períodos prolongados. Las muestras de suero y plasma pueden almacenarse a 2-8 °C durante un máximo de 1 día, para el almacenamiento a largo plazo, las muestras deben mantenerse por debajo de -20 °C.La sangre entera recolectada por punción venosa debe almacenarse a 2-8 °C si el ensayo se va a utilizar en el plazo de 1 día a partir de la recolección.No congele las muestras de sangre entera.
• Antes del ensayo, las muestras deben ser llevadas a temperatura ambiente. Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes del ensayo.
• EDTA K2, heparina de sodio, citrato de sodio y oxalato de potasio pueden utilizarse como tubo anticoagulante para la recogida de la muestra de sangre.

Dilución de la muestra

• El ejemplar (75 L de suero/ plasma/ sangre entera) se puede añadir directamente con la micro pipeta en el búfer.
• Cierre el tubo y agite la muestra a mano durante aproximadamente10 segundos.por lo que la muestra y el amortiguador de dilución se mezclan bien.
• Deje que la muestra diluida se homogeneice durante aproximadamenteUn minuto.
• Lo mejor es colocar la muestra diluida en una bolsa de hielo y dejarla a temperatura ambiente durante no más de 2 horas.

[MATERIALES]

Materiales proporcionados

• Cásetes de prueba • Tubos de recolección de muestras con búfer

• Tarjeta de identificación • Insert del paquete

Se requieren materiales pero no se proporcionan

• temporizador • centrifugadora •Analisador de análisis inmunológico de fluorescencia

• Pipeta

[Instrucciones de uso]

Para obtener las instrucciones completas sobre el uso del ensayo, véase el manual de operación del analizador de inmunoensayo de fluorescencia.

Antes del ensayo, se permite que el ensayo, la muestra, el amortiguador y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15-30 °C).

• Encienda la fuente de alimentación del analizador. Luego, según la necesidad, seleccione el modo de prueba estándar o prueba rápida.
• Saca la tarjeta de identificación e inserta en el puerto del analizador.
• Seero/plasma:Transferencia75 μL de suero/plasmaen el tubo tampón, mezclar bien la muestra y el tampón.

Sangre entera:Transferencia75 μL de sangre enteraen el tubo tampón con pipeta; mezclar bien la muestra y el tampón.

• Se añade la muestra diluida con una pipeta:Las demásMuestra diluida de 75 μLen el pozo de la muestra. Inicie el temporizador al mismo tiempo.
• Hay dos modos de prueba para el analizador de inmunoensayo de fluorescencia, el modo de prueba estándar y el modo de prueba rápida.

"Prueba rápida" modo: insertar el casete de prueba en el analizador en15 minutos.después de aplicar la muestra y hacer clic"Nueva prueba", el analizadorautomáticamentedar el resultado del ensayo después de unos segundos.

"Prueba estándar" modo: inserte el casete de prueba en el analizador inmediatamente después de la aplicación de la muestra, haga clic en "Nuevo ensayo" al mismo tiempo, el analizador automáticamente contará15 minutos.Después de la cuenta regresiva, el analizador dará el resultado de inmediato.

[Interpretación de los resultados]

Los resultados son leídos por el analizador de fluorescencia.

El resultado de las pruebas de cTnI, D-dimero y NT-proBNP se calcula mediante el analizador de inmunoensayo de fluorescencia y se muestra en la pantalla.Por favor, consulte el manual de usuario del analizador de inmunoensayo de fluorescencia..

El rango de linealidad de la prueba cTnI es de 0,1 a 40 ng/ml.

El rango de linealidad del ensayo D-dimero es de 100-10000 ng/ml.

El rango de linealidad de NT-proBNP es de 0,3-22 ng/ml.