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Detección ácida nucléica del coronavirus nuevo

July 27, 2021

La detección ácida nucléica tiene las características del diagnóstico precoz, de la alta sensibilidad y de la especificidad, y es el “patrón oro” para diagnosticar nueva pulmonía coronaria. Actualmente, la tecnología cuantitativa fluorescente en tiempo real más ampliamente utilizada de RT-PCR. Generalmente, las dos blancos situadas en los genes de ORF1ab y de N del virus se detectan. El mismo espécimen debe resolver el positivo doble de la blanco o la prueba repetida como el solo positivo de la blanco, o los dos especímenes deben resolver la sola blanco al mismo tiempo para confirmar el positivo del ácido nucléico del virus SARS-CoV-2.

 

1. ¿Principio de equipo ácido nucléico de la detección? La secuencia única del gen del virus se utiliza como la blanco de la detección. Con la amplificación de la polimerización en cadena, las secuencias de ADN de la blanco elegimos aumentos exponencial. Cada secuencias de ADN amplificadas se pueden combinar con una punta de prueba fluorescente-etiquetada que añadimos por adelantado. , Señal fluorescente de la producción, más genes amplificados, más fuerte es de la blanco la señal fluorescente acumulada. En muestras sin el virus, puesto que no hay amplificación del gen de la blanco, ningún aumento en señal de la fluorescencia puede ser detectado. Por lo tanto, la detección ácida nucléica es realmente determinar si hay ácido nucléico viral en la muestra detectando la acumulación de señales fluorescentes.

 

2. ¿Cuáles son los tipos de muestras de prueba ácidas nucléicas?

Generalmente, esponjas nasales, esponjas de la garganta, esponjas nasofaríngeas, esputo, líquido de lavado bronquial, líquido de lavado alveolar y así sucesivamente.

 

3. la detección del Cinco-paso el nuevo procedimiento de la detección del coronavirus requiere cinco pasos: muestreo, retención de la muestra, almacenamiento, extracción ácida nucléica, y prueba del ordenador. Esto requiere experimentos científicos rigurosos terminar.

1. Limpie la pared trasera de la esponja faríngea y de las amígdalas faríngeas bilaterales 5-10 veces cada uno con una esponja faríngea, y guarde el girar de la esponja;

2. Requieren a los personales médicos guardar la muestra, y la cabeza de la esponja se sumerge en la solución de la preservación de la célula, y la cola está quebrada. Apriete el casquillo del tubo inmediatamente;

3. Ahorre, ponga el tubo de la muestra en un bolso sellado y enviarlo para la inspección a tiempo, y el proceso de la inspección requiere un ambiente estricto del transporte, almacenado en 2-8 grados de cent3igrado.

4. Actúe la extracción ácida nucléica, extraiga el ácido nucléico de la muestra desactivada del virus para la detección subsiguiente, y utilice el equipo automatizado, tal como un extractor ácido nucléico.

5. Detección ácida nucléica de la polimerización en cadena de la fluorescencia, es decir, detección de la máquina, tarda 70-80 minutos para que el extracto experimente la reacción fluorescente de la amplificación de la polimerización en cadena.

 

4. ¿Cuáles son los problemas con la detección ácida nucléica?

El falso negativo, debido al muestreo incorrecto, al almacenamiento incorrecto del espécimen, al uso de diversos tipos de especímenes, y al uso de reactivo de diversos fabricantes puede hacer los resultados de la prueba ácida nucléicos ser “falso negativo” y diagnosis faltada;

Los altos requisitos para el equipo o las plataformas de la detección, los altos instrumentos de la sensibilidad RT-PCR son costosos, y requieren alta limpieza y a operadores del laboratorio;

La prueba ácida nucléica tarda un tiempo largo, y tarda generalmente 4-6 horas para terminar una prueba de RT-PCR. Sin embargo, considerando el transporte de la muestra, en el caso de una reserva grande de muestras, los resultados se pueden divulgar generalmente tan pronto como 24 horas. Por lo tanto, cuando la prueba ácida nucléica es negativa, la adición detección del anticuerpo de IgM y de IgG puede compensar los defectos que la prueba ácida nucléica es probable causar a diagnosis faltada.