Cassette de prueba rápida para la enfermedad celíaca
(Sangre entera/suero/plasma)
OCEA-402
Una prueba rápida para la detección cualitativa de anticuerpos IgA contra el tTG humano en sangre humana, suero o plasma.
Solo para uso profesional de diagnóstico in vitro.
[Uso previsto]
El Cassette de Prueba Rápida de la Celíaca (Sangre Completa/ Suero/ Plasma) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección cualitativa de anticuerpos IgA contra el tTG humano en sangre completa humana, suero,o plasma como ayuda en el diagnóstico de la enfermedad celíaca.
[RESUMO]
La enfermedad celíaca (EC) es un trastorno sistémico inmunomediado provocado por el consumo de gluten, que ocurre en individuos genéticamente predispuestos.Es causada por una intolerancia permanente al gluten y específicamente a su fragmento proteico llamado gliadinaLa ingestión de dicha proteína para personas con predisposición genéticainducen una lesión grave de la mucosa intestinal caracterizada histológicamente por una hiperplasia de criptas con atrofia total o subtotal de los microvilos intestinalesAunque el diagnóstico definitivo de la enfermedad celíaca se basa en los cambios histológicos característicos observados en las biopsias intestinales, las pruebas serológicas,como la detección de anticuerpos anti-tTG y anti-endomisio., representan métodos de análisis más baratos y menos invasivos para la detección de la enfermedad.
El Cassette de Prueba Rápida de la Celíaca es una prueba inmunocromatográfica diseñada para la detección de anticuerpos IgA contra la transglutaminasa en sangre entera, suero o plasma.La transglutaminasa es el principal autoantígeno reconocido por los anticuerpos antiendomisiales..
[Principio]
El Cassette de Prueba Rápida de la Celíaca (Sangre Completa/Serum/Plasma) es un inmunoensayo cualitativo basado en membrana para la detección de anticuerpos IgA contra el tTG humano en sangre completa, suero o plasma.la muestra reacciona con el antígeno tTG conjugado en el casete de ensayoEl conjugado de antígeno de oro se unirá al anticuerpo anti-tTG en la muestra, que a su vez se unirá con la IgA anti-humana recubierta en la membrana.la IgA anti-humana en la membrana se unirá al complejo anticuerpo-antígeno causando la formación de una línea de color en la región de la línea de prueba de la pruebaLa intensidad del color variará en función de la cantidad de anticuerpos presentes en la muestra. La aparición de una línea coloreada en la región de prueba debe considerarse como resultado positivo.Servir como control de procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de la línea de control que indique que se ha añadido el volumen adecuado de muestra y se ha producido el deslizamiento de la membrana.
[Reactivos]
El ensayo contiene partículas de oro conjugadas con antígeno tTG y anticuerpos IgA antihumanos recubiertos en la membrana.
[Precauciones]
Sólo para uso profesional de diagnóstico in vitro.
No coma, beba ni fume en el área donde se manipulan las muestras o los kits.
Maneje todas las muestras como si contenieran agentes infecciosos.Observar las precauciones establecidas contra los peligros microbiológicos durante todo el procedimiento y seguir los procedimientos estándar para la eliminación adecuada de las muestras..
Use ropa de protección, como abrigos de laboratorio, guantes desechables y protección para los ojos cuando se analicen las muestras.
La humedad y la temperatura pueden afectar negativamente a los resultados.
[almacenamiento y estabilidad]
El kit puede almacenarse a temperatura ambiente o refrigerado (2-30°C).La caja de ensayo debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso.No congelar, no utilizar más allá de la fecha de caducidad.
[Recolección y preparación de muestras]
El Test Rapid Cassette para la celíaca (sangre entera/ suero/ plasma) se puede realizar con sangre entera, suero o plasma.
Para recolectar muestras de sangre entera de Fingerstick:
Lavar las manos del paciente con agua tibia y jabón o limpiarlas con un hisopo con alcohol.
¢ Masajear la mano sin tocar el sitio de la punción frotando la mano hacia la punta del dedo medio o anular.
Perfora la piel con una lanceta estéril y limpia el primer signo de sangre.
• Frote suavemente la mano de la muñeca a la palma de la mano hasta el dedo para formar una gota redondeada de sangre sobre el sitio de la punción.
¢ Añadir la muestra de sangre entera de Fingerstick al casete de ensayo utilizando un gotero o una micropipeta de 20 μL.El gotero provisto con el ensayo distribuye aproximadamente 20 μL en una gota, incluso si se aspira más sangre en el gotero..
Separar el suero o el plasma de la sangre tan pronto como sea posible para evitar la hemólisis.
El ensayo debe realizarse inmediatamente después de la recogida de las muestras.Las muestras de suero y plasma pueden almacenarse a 2-8°C durante un máximo de 3 días.Para el almacenamiento a largo plazo, las muestras deben mantenerse a menos de -20°C. La sangre entera recolectada por punción venosa debe almacenarse a 2-8°C si el análisis se va a realizar dentro de los 2 días siguientes a la recolección.No congele muestras de sangre entera.
Se debe analizar inmediatamente la sangre entera recolectada por punción de dedos.
Lleve las muestras a temperatura ambiente antes del ensayo. Las muestras congeladas deben descongelarse completamente y mezclarse bien antes del ensayo. Las muestras no deben ser congeladas y descongeladas repetidamente.
Si se van a enviar muestras, éstas deben estar envasadas de acuerdo con la normativa local para el transporte de agentes etiológicos.
EDTA K2, heparina sódica, citrato de sodio y oxalato de potasio pueden utilizarse como anticoagulantes para la recogida de la muestra.
[MATERIALES]
Materiales proporcionados
Cásetes de prueba
Goteadores
Amortización
Insertado del envase
Materiales requeridos pero no suministrados
Contenedor de recogida de muestras
Centrifugadora
Micropipetas
Temporizador
Lancetas (sólo para la inyección de sangre entera)
[Instrucciones de uso]
Antes del ensayo, dejar que el casete de ensayo, la muestra, el amortiguador y/o los controles alcancen la temperatura ambiente (15-30°C).
1Retire la caja de ensayo de la bolsa sellada y use dentro de una hora.
2Coloque el cassette en una superficie limpia y plana.
• Utilizar un gotero: sostenga el gotero en posición vertical, dibuje la muestra aproximadamente 1 cm por encima del extremo superior de la boquilla como se muestra en la ilustración siguiente,transferir 1 gota de suero/plasma (aproximadamente 10 μL) o 2 gotas de sangre entera (aproximadamente 20 μL) al pozo de la muestra (S) del cassette de ensayo, añadir 2 gotas de tampón (aproximadamente 80 μL) y encender el temporizador.
Utilice una micropipeta: pipeta y distribuye 10 μL de suero/ plasma o 20 μL de sangre entera en el pozo de la muestra (S) del cassette de prueba,luego añadir 2 gotas de tampón (aproximadamente 80 μL) y encender el temporizador.
3. Espere a que aparezcan las líneas de color. Lea el resultado a los 10 minutos. No interprete el resultado después de los 20 minutos.
Nota: Se recomienda no utilizar el tampón más de 6 meses después de abrir el vial.
[Interpretación de los resultados]
(Véase la ilustración de arriba)
Positivo: * Aparecen dos líneas de color. Una línea de color debe estar en la región de control
(C) y otra línea de color debe estar en la región de ensayo (T).
*NOTA: La intensidad del color en la región de la línea de ensayo (T) variará en función de la concentración de anticuerpos tTG IgA presentes en la muestra.Cualquier tonalidad de color en la región de ensayo debe considerarse positiva..
NEGATIVO: aparece una línea de color en la región de control (C).
INVALIDO: no aparece la línea de control. El volumen insuficiente de la muestra o las técnicas de procedimiento incorrectas son las razones más probables para la falla de la línea de control.Repasar el procedimiento y repetir el ensayo con un nuevo casete de ensayoSi el problema persiste, deje de usar el kit de prueba inmediatamente y póngase en contacto con su distribuidor local.
[CONTROL DE LA CALIDAD]
Los controles internos de procedimiento están incluidos en el ensayo. Una línea de color que aparece en la región de control (C) es un control interno de procedimiento.Confirma un volumen de muestra suficiente y una técnica procedimental correctaLas normas de control no se suministran con este kit; sin embargo,se recomienda que los controles positivos y negativos sean sometidos a ensayos como buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento de ensayo y verificar el correcto funcionamiento del ensayo..
[Limitaciones]
1.La cinta de prueba rápida para la enfermedad celíaca (sangre entera/suero/plasma) se utiliza únicamente para diagnóstico in vitro.Solo muestras de suero o plasmaNi el valor cuantitativo ni la tasa de aumento de la concentración de anticuerpos tTG IgA pueden determinarse mediante este ensayo cualitativo.
2.La cinta de prueba rápida para la enfermedad celíaca (sangre entera/suero/plasma) sólo indicará la presencia de anticuerpos tTG IgA en la muestra y no debe utilizarse como único criterio para el diagnóstico de la enfermedad celíaca..
3Un resultado negativo de la prueba no excluye la posibilidad de enfermedad celíaca.
4.Puede producirse un resultado negativo si la cantidad de anticuerpos tTG IgA presentes en la muestra es inferior a los límites de detección del ensayo,o los anticuerpos tTG IgA detectados no están presentes durante la etapa de la enfermedad en la que se recolecta una muestra.
5.Si el síntoma persiste, mientras que el resultado de la cinta de prueba rápida de celíaco (sangre entera/suero/plasma) es negativo,se recomienda volver a recoger la muestra del paciente unos días después o realizar el ensayo con un método de ensayo alternativo..
6Los resultados obtenidos con este ensayo sólo deben interpretarse en conjunción con otros procedimientos de diagnóstico y resultados clínicos.
7El hematocrito de la sangre entera debe estar entre 25% y 65%.
[Características de rendimiento]
Sensibilidad y especificidad
El Cassette de Prueba Rápida para la Celíaca (sangre entera/suero/plasma) se ha comparado con una prueba de celíaca comercial líder que utiliza muestras clínicas.
Los resultados muestran que la sensibilidad relativa de la cinta de prueba rápida de celíaco (sangre completa/suero/plasma) es del 95,0% y la especificidad relativa es del 98,5%.
Sensibilidad relativa: 95,0% (IC* del 95%: 75,1%~99,9%)
Especificidad relativa: 98,5% (95% CI*: 94,6%~99,8%)
Precisión: 98,0% (CI del 95%*: 94,3%~99,6%) *Intervalos de confianza
